抗體或蛋白如何保存？

抗體或蛋白作為蛋白質試劑，保存條件是非常重要的。只要條件得當，抗體或蛋白一般都可以保存幾個月到幾年。

保存溫度

對于我們的大部分抗體或蛋白而言，分裝為小等份在 -20 ℃ 或 -80 ℃ 下凍存是最佳的長期保存條件。此外，在收到抗體或蛋白后，也可暫時保存至4℃冰箱中，短期保存時間為1-2周。也有一小部分抗體或蛋白適合長期保存于4℃冰箱。

分裝前應先離心沉降掛在管壁和管蓋上的抗體或蛋白，分裝量取決于您的實驗常用量，但建議不能少于10μl，以避免蒸發等帶來的干擾。分裝后的抗體或蛋白試劑應盡量避免反復凍融，可短時間（1-2周）保存于4℃冰箱中。

反復凍融可能使抗體或蛋白變性，導致抗體或蛋白形成聚集體，從而降低其結合能力。對大部分抗體或蛋白而言，在-20 ℃下保存就已足夠；在-80 ℃下保存并無明顯優勢。保存抗體或蛋白要避免使用無霜冰箱，因為凍融循環（用于減少霜的形成）會造成抗體或蛋白反復凍融而失活。

部分抗體或蛋白試劑中會加入終濃度40%-50%的甘油使其在-20℃下保持溶液狀態，從而降低凍融損傷。此類抗體或蛋白產品請勿儲存于-80℃冰箱中，否則仍會凝固。值得注意的是，抗體或蛋白在加入甘油后容易被細菌污染，操作時應小心，確保無菌。

以下是一些需要注意的常見特例：

部分酶偶聯抗體或蛋白，需要保存在 4 ℃，這些抗體或蛋白經歷凍融不僅會影響抗體或蛋白的結合能力，還會降低酶活性。
偶聯抗體或蛋白（無論是偶聯有熒光染料、酶還是生物素）應盡量保存在深色樣品瓶中或用錫箔紙包裹樣品瓶。暴露于光下會影響偶聯物的活性。熒光偶聯物尤其容易發生光致漂白，因此在實驗各階段都應避光。
IgG3 同型抗體或蛋白的獨特之處在于其解凍后容易形成聚集體，因此應始終保存在 4 ℃。
腹水液中可能含有蛋白酶，因此收到后應盡快凍存。
 

防止降解

抗體或蛋白試劑稀釋至工作濃度后，建議及時使用，不建議對稀釋后的抗體或蛋白進行長時間保存。如果必須保存，建議保存于4℃并于一周以內使用。一般而言，蛋白質濃度高于1mg/ml時更不容易降解，因此部分抗體或蛋白試劑中加入了牛血清白蛋白（BSA）作為蛋白質穩定劑來防止降解。加入的蛋白質還能盡可能減少抗體或蛋白結合到容器壁上造成的損失。

需要注意的是，請勿向將要進行偶聯的抗體或蛋白中加入蛋白質穩定劑，因為蛋白質穩定劑會與抗體或蛋白競爭，降低偶聯效率。

防止污染

為了防止微生物污染，可將疊氮化鈉作為抗菌劑加入抗體或蛋白工作液中，保持最終濃度為 0.02% (w/v)。阿拉丁的多款抗體或蛋白中都含有疊氮化鈉，濃度范圍為 0.02%-0.05%。抗體或蛋白數據表的保存緩沖液部分對此有說明。

此外，如果要對活細胞進行染色或處理，或進行體內研究時，請務必使用不含疊氮化鈉的試劑。抗菌劑會阻斷細胞色素電子傳遞系統，對大部分生物體都有毒害作用。

高濃度的疊氮化鈉會干擾涉及胺基的所有偶聯反應，因此必須在進行偶聯反應之前將其去除。或可選用0.01%硫柳汞鈉（硫柳汞），這種抗菌劑不含伯胺。

抗體或蛋白溶液中的疊氮化鈉可通過透析或凝膠過濾去除。IgG 的分子量為 150,000 Da（IgM 約為 600,000 Da），疊氮化鈉的分子量為 65 Da。截留分子量為 14,000 Da 的微透析裝置可去除疊氮化鈉。

透析過程在燒杯中（置于磁力攪拌器上，溫度保持 4 ℃）進行，每毫升抗體或蛋白使用至少 1 升預冷的 PBS，攪拌透析裝置 6 小時。更換 PBS 兩次，每次更換后均攪拌至少 6 小時。如有可能，所有材料都應滅菌，并且應在無菌條件下處理所得制備物。